色譜柱的平衡及組成

色譜柱的平衡及組成

色譜柱由柱管、壓帽、卡套（密封環(huán)）、篩板（濾片）、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成，壓力不高于70 kg/cm2 時，也可采用厚壁玻璃或石英管，管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效，減小管壁效應，不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度，其效果與拋光相同。還有使用熔融硅或玻璃襯里的，用于細管柱。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板，是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金，孔徑0.2~20μm(5~10&μm)，取決于填料粒度，目的是防止填料漏出。

色譜柱是由柱管和固定相組成，按照拄管的粗細和固定相的填充方式分為（1）填充柱；（2）毛細管柱。

色譜柱的平衡

反向色譜柱在經(jīng)過出廠測試后是保存在甲醇（或乙腈）/水中的。請一定確保您所使用的活動相和甲醇（或乙腈）/水互溶，由于色譜柱在運輸過程中可能會干掉，因此在用活動相分析樣品之前，應使用分10-20倍的體積的甲醇或乙腈平衡色譜柱。

    假如您所使用的活動相中含有緩沖鹽，應留意用含水量很高（約95%）的活動相過渡，樣品分析完后，沖洗柱子是亦然。過往傳統(tǒng)的方法使用純水沖洗，對于非極性柱，如C8或C18，由于純水不能浸潤填料表面而沖倒碳鏈，造成柱效下降。

    另外，分析樣品時，由于純水在填料表面不能浸潤形成水膜，出現(xiàn)樣品不保存而分不開，重現(xiàn)性差，所以對于一般的C18或C8，有機溶劑不能低于5%。硅膠柱或極性色譜柱在經(jīng)過出廠測試后是保存在正庚烷中的。假如該色譜柱需要使用含水或甲醇或乙腈的活動相，請在使用活動相之前用乙醇或異丙醇平衡。

    色譜柱在平衡過程中，將流速緩慢地進步用活動相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線（緩沖鹽或離子對試劑濃度假如較低，則需要較長的時間平衡）。