如何保證良好的陰離子交換色譜柱性能與柱壽命

　　如何保證良好的陰離子交換色譜柱性能與柱壽命
　　
　　陰離子交換色譜柱怎樣選擇填料粒度
　　
　　目前,商品化的色譜料粒度從1um到超過30um均有銷售,而目前分析分離主要用3um,5um和10um填料,填料的粒度主要影響填充柱的兩個(gè)參數(shù),即柱效和背壓.粒度越小,填充柱的柱效越高;小于3um的填料應(yīng)用,在相同選擇性條件下,提高柱效可提高分離度,但不是*的因素.如果固定相選擇是正確,但是分離度不夠,那么選擇更小粒度的填料是很有用的,3um填料填充柱的柱數(shù)比相同條件下的5um填料的柱效提高近30%;然而,3um的色相譜的背壓卻是5um的2倍.與此同時(shí),柱效提高意味著在相同條件下可以選擇更短的色譜柱,以縮短分析時(shí)間,另外,可以采用低粘度的溶劑做流動(dòng)相或增加色譜柱的使用溫度,比如用乙腈代替甲醇,以降低色譜柱的壓力.
　　
　　如何保證良好的陰離子交換色譜柱性能與柱壽命
　　
　　認(rèn)證閱讀色譜柱使用說(shuō)明書;
　　
　　使用填充良好的色譜柱;
　　
　　盡量減少壓力波動(dòng),避免機(jī)械及熱沖擊;
　　
　　使用保護(hù)柱及在線過濾器;
　　
　　經(jīng)常以強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱;
　　
　　充分過濾樣品及流動(dòng)相,盡量避免雜質(zhì)微粒與強(qiáng)保留成分;
　　
　　用穩(wěn)定的固定相(C18zui穩(wěn)定);
　　
　　在中等PH值操作(6~8),用有機(jī)緩沖溶液;
　　
　　色譜柱使用溫度小于40℃;
　　
　　硅膠基質(zhì)的的色譜柱,應(yīng)保持流動(dòng)相的PH值范圍在3.0~8.0;
　　
　　在水流動(dòng)相與緩沖溶液中加200ppm的疊氮鈉;
　　
　　流動(dòng)相中含有緩沖溶液,應(yīng)注意應(yīng)95:5的水及有機(jī)溶劑過渡,有機(jī)溶劑不能低于5%;
　　
　　過夜或貯存時(shí),沖洗掉鹽和緩沖液,用純有機(jī)溶劑流動(dòng)相保存(乙晴).